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嵌合荧光检测法(Sybr Green I 检测模式)

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       Sybr Green I 检测模式: SYBR Green I 是一种能与双链DNA 结合发光的染料,实验时可以实时监测反应体系中的SYBR Green I荧光强度,达到检测PCR产物扩增量(双链DNA)的目的。SYBR Green I 的最大吸收波长约为497nm,发射波长最大约为520nm。SYBR Green I 的缺点:由于SYBR Green I没有特异性,不能识别特定的双链,只要是双链就会结合发光,对PCR反应中的非特异性扩增或引物二聚体也会产生荧光,通常本底较高,所以在临床上使用可能会有假阳性发生。 SYBR Green I的优点:SYBR Green I的优点是因为其缺点产生,由于它能所有的双链DNA相结合,所以对不同模板不需特别定制不同的探针,通用性较好,价格也较低。这对科研是很有利的,因此国内外在科研中使用比较普遍。 通过PCR反应生成双链DNA,SYBR Green I与双链DNA结合发出荧光,通过检测荧光不但可以检测反应体系中的DNA扩增量,同时还能测定扩增产物的DNA融解温度。 SYBR Green I 是一种能与双链DNA 结合发光的荧光染料。其与双链DNA结合後, 荧光大大增强。因此, SYBR Green I的荧光信号强度与双链DNA的数量相关,可以根据荧光信号检测出PCR体系存在的双链DNA数量。

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