人 三型前胶原肽（human PIIINP）ELISA

来自Transhold

                           三型前胶原肽 PIIINP ELISA 试剂盒

用途： 本试剂盒用于定量检测人血清中的PIIINP的浓度。

试剂盒组成(储存于2－8℃)

酶标板(Coated Wells)	96wells	浓缩洗涤液(20X)(Washing Concentrate)	30ml
标准品(Standards)	200ng/ml	标本稀释液（Sample Diluent）	1 bottle
终止液(Stop Solution)	6ml	Tracer	51x
显色液（Chromogen/Substrate）	10ml	Biotin Anti PIIINP	15ml

标本收集：

1. 标本中若有悬浮物,应离心去除。

2. 最好使用新鲜标本，如需保存，可于2－8℃冷藏7天或－20℃冷冻4周。

准备工作：

1. 试剂盒应平衡至室温再试验。

2. 浓缩洗涤液用双蒸水稀释成1x（至600ml）。未用完的放回2－8℃。

3. 配制Incubation Solution: Tracer使用前请按每次实际需要量以1：51用Biotin Anti PIIINP 稀释（打开旋盖前请按500－1000RPM离心片刻，混匀后吸出）。即100ul Tracer（一支）加入5ml Biotin Anti PIIINP中。

4. 标准品使用前请按每次实际需要量用标本稀释液稀释成不同浓度的标准品（100，50，25，12.5，0ng/ml）。已稀释的标准品若未用完应丢掉（打开旋盖前请按500－1000RPM离心片刻，混匀后吸出）。

操作步骤：

1. 取出所需板条，其余仍密封放回2－8℃

2. 加入100ul不同浓度的标准品、待测样品于相应孔中。37℃90分钟。

3. 洗板：甩尽孔内液体，每孔加入洗涤液350ul，静止30秒后甩尽液体，在厚叠吸水纸上拍干，洗5次。

4. 每孔加入Incubation Solution 75ul， 37°C 45分钟。

5. 洗板：甩尽孔内液体，每孔加入洗涤液350ul，静止30秒后甩尽液体，在厚叠吸水纸上拍干，洗5次。

6. 每孔加入显色液75ul，37°C 15±5分钟。

7. 每孔加入终止液50ul，混匀，即刻在450nm处读数。

结果判断：

1. 各孔（包括零孔）OD值应减去零孔的OD值。

2. 以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线。

3. 根据标本的OD值在标准曲线上查得其含量。

预期值：

正常值：<12ng/ml。