人 白介素21（human IL-21）ELISA
来自Transhold
IL-21 ELISA
用途： 本试剂盒用于定量检测人血清或血浆中的IL-21的浓度。
试剂盒组成：
| 酶标板(Coated Wells) | 48wells | Anti- IL-21 Biotin | 11ml |
| 样品稀释液 | 25ml | 标准品(Standards) | 1 set |
| TMB显色液 | 5ml | HRP | 11ml |
| 终止液(Stop Solution) | 5ml | 浓缩洗涤液（10x） | 30ml |
标准品已经1:100稀释。
需要但未提供的材料
1. 可在450nm处进行读数的酶标仪；
2. 能精确吸取10-200µL的移液器；
3. 可调多道（8）移液器（50－200µL）；
4. 供可调多道移液器使用的试剂存放槽；
5. 洗瓶或洗板机；
6. 蒸馏水或去离子水；
7. 1升的圆柱形量筒；
8. 血清移液器：1和（10或25 mL）；
9. 移液器枪头；
10. 纸巾；
11. 计时器，用以监控温育步骤；
12. 处理池和消毒剂（例如：0.5% 次氯酸钠, 10% 家用漂白水）；
注意事项:
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入HRP或底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9. 不能使用过期产品。
10. 如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。
保存： 贮藏于2-8C。
样品： 在此检测中，可使用人血清或血浆样品。
准备工作：
1. 样品稀释100倍（5ul血清或血浆加500ul样品稀释液），标准品不稀释。
2. 浓缩洗涤液（10x）用双蒸水稀释成1X（至300ml）
操作步骤：
试剂盒应平衡至室温（20-25C ）再试验。 取出所需反应板。
1. 分别加入5ul标准品(Standards)、5ul已稀释血清或血浆于反应板孔中，轻轻混匀10秒。
2. 每孔加入200ul Biotin Anti IL-21，轻轻混匀30秒，37℃温育30分钟。
3. 洗板：甩尽板内液体，用洗涤液洗涤反应板，并去除水滴（在厚叠吸水纸上拍干）；这样反复洗涤5次。
4. 每孔加入200ul HRP，轻轻混匀10秒，37℃温育30分钟。
5. 洗板：甩尽板内液体，用洗涤液洗涤反应板，并去除水滴（在厚叠吸水纸上拍干）；这样反复洗涤5次。
6. 每孔加入100ul TMB显色液， 轻轻混匀10秒，置暗处室温温育20分钟。
7. 每孔加入100ul终止液（Stop Solution）。轻轻混匀30秒；15分钟内在450nm处读OD值。
以OD值为纵坐标，以标准品浓度为横坐标，绘制标准曲线。根据血清或血浆样品的OD值可在标准曲线上查出其浓度。（曲线适用y＝ax2＋bx＋c）
标本的浓度=标准曲线上查出的浓度
举例：
