实时定量PCRTaqMan探针设计指南
●探针位置尽可能地靠近上游引物；
●探针长度通常在25－35bp，Tm值在65－70℃，通常比引物TM高5－10℃，GC含量在40%－70%。
●探针的5’端应避免使用碱基G。
●整条探针中，碱基C的含量要明显高于G的含量。
●为确保探针的特异性，最好将设计好的序列在blast中核实一次，如果发现有非特异性互补区，建议重新设计探针。(www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST)
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